Иммунологическая и генетическая диагностика первичных иммунодефицитов
Агаммаглобулинемия
Определение иммуноглобулинов IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций CD19+ B лимфоцитов и CD20+ методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Определение блока дифференцировки В-лимфоцитов в костном мозге для диагностики Х-сцепленной и аутосомно-рецессивной формы агаммаглобулинемии
Определение экспрессии BTK в монцитах периферической крови
Молекулярно-генетический анализ гена Btk (амплификация 19 экзонов гена, SSCP- анализ 19 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Гипогаммаглобулинемия (IgG, IgA)
Определение IgG, IgM, IgA и субклассов IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
Определение субпопуляций В лимфоцитов СD19+ методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Hyper IgM-syndroms
Определение IgM, IgG, IgA
Определение В-клеток памяти IgD-CD27+CD19+ в периферической крови
Определние экспрессии CD40L (СD154) на активированных Т-лимфоцитах после стимуляции их in vitro (PHA+) определение экспрессии CD40 на В-лимфоцитах, методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Мутационный анализ гена CD40L (амплификация 5 экзонов гена, SSCP- анализ 5 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Общая вариабельная иммунологическая недостаточность
Определение классов и субклассов IgG, IgM, IgA
Определение изогемагглютининов к антигенам группы крови
Определение субпопуляций Т и В лимфоцитов: СD19+CD27+ B-клеток памяти, СD19+CD27+ IgM-IgD- изотип переключеных В-клеток, CD19+CD21+ зрелых В-клеток методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Мутационный анализ генов TACI (амплификация 5 экзонов гена, SSCP- анализ 5 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена), ICOS (Синтез кДНК и 2ПЦР анализа)
Тяжелый комбинированный иммунодефицит
Определение абсолютного и относительного числа Т- и В-лимфоцитов натуральных киллеров, Определение классов и субклассов IgG, IgM, IgA
Дополнительно:
Определение тимических мигрантов CD4+CD31+CD45RA+;
Определение наивных и Т-лимфоцитов памяти (CD4+/CD8+/CD45RA+/CD45RO+);
Определение продуктов генов: 1) определение экспрессии CD127 (α субъединицы рецептора к IL7) на лимфоцитах и на Т-лимфоцитах; 2) CD132 (γ-цепи рецепторов для цитокинов (IL-2, 4, 7, 9, 15 и 21) на активированных В-лимфоцитах; 3) ZAP-70 – определение внутриклеточной экспрессии молекулы сигналлинга, в Т-лимфоцитах; методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Цитохимическое исследование активности аденозиндезаминазы и пуриннуклеотидфосфорилазы.
Мутационный анализ генов:
γ-цепи рецепторов для цитокинов (IL-2, 4, 7, 9, 15 и 21) (амплификация 8 экзонов гена, SSCP- анализ 8 экзонов, ресеквенирование 2-х участков гена);
JAK3 (амплификация 24 экзонов гена, SSCP- анализ 24 экзонов, ресеквенирование 4-х участков гена);
RAG1 (амплификация 13 экзонов гена, SSCP- анализ 13 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена);
RAG2 (амплификация 7 экзонов гена, SSCP- анализ 7 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена);
IL-7Ra (амплификация 9 экзонов гена, SSCP- анализ 9 экзонов, ресеквенирование 2-х участков гена;
ADA (амплификация 12 экзонов гена, SSCP- анализ 12 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Дефицит МНС I и MHC II класса
(синдром «Лысых лимфоцитов»)
Определение субпопуляций Т лимфоцитов (СD4+ Т-хелперов, CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов), определение экспрессии HLA-DR на Т- и В-лимфоцитах, определение HLA-A, B,C методом проточной цитометрии.
Синдром Вискотта-Олдрича
Определение классов и субклассов IgG, IgM, IgA
Стандартное иммунологическое исследование,
Определение экспрессии WASP в лимфоцитах методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Исследование первичного гемостаза – агрегатограмма (нарушений функций тромбоцитов – адгезии, агрегации и др.). Определение размера тромбоцитов методом световой микроскопии.
Молекулярно-генетическое исследование гена WAS (амплификация 12 экзонов гена, SSCP- анализ 12 экзонов, ресеквенирование 3-х участков гена)
Атаксия-телеангиоэктазия (синдром Луи-Бар)
Определение уровня IgA
Стандартное иммунологическое исследование
Цитогенетическое исследование (для выявления хромосомной нестабильности)
Анализ репарации ДНК (Определение количества разрывов в ДНК, индуцированных радиационным облучением, в культивированных фибробластах кожи и лимфоцитах периферической крови пациента)
Определение альфа-фетопротеина, РЭА (раковый эмбриональный антиген)
Молекулярно-генетическое исследование гена АТМ (амплификация 64 экзонов гена, SSCP- анализ 64 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Синдром Ниймеген
Определение IgG, IgA, IgM
Стандартное иммунологическое исследование
Цитогенетическое исследование (для выявления хромосомной нестабильности)
Анализ репарации ДНК (Определение количества разрывов в ДНК, индуцированных радиационным облучением, в культивированных фибробластах кожи и лимфоцитах периферической крови пациента)
Молекулярно-генетическое исследование гена NBS (Nijmegen Breakage Syndrome) (амплификация 12 экзонов гена, SSCP- анализ 12 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Синдром Ди Джорджи
Определение IgG, IgA, IgM
Стандартное иммунологическое исследование
Определение количества тимических мигрантов CD4+CD45RA+CD31+ методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Исследование на гормоны (паратиреотропин)
Молекулярно-генетическое исследование – выявление del22q11.2 методом FISH (Fluorescent in situ Hybridization).
Гипер-IgE синдром
Стандартное иммунологическое исследование
Определение классов и субклассов IgЕ, IgG, IgM, IgA,
Определение Th17 (CD4+IL17+) в периферической крови методом проточной цитофлуориметрии
X-сцепленный лимфопролиферативный синдром
Определение классов и субклассов IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций лимфоцитов (иммунорегуляторный индекс СD4+/СD8+, СD19+CD27+ B-клеток памяти, инвариантных натуральных киллеров iNKT (TCRvβ+ TCRvα+) методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Тест на цитотоксическую активность натуральных киллеров
Поиск мутаций в генах SH2D1(амплификация 4 экзонов гена, SSCP- анализ 4 экзонов, ресеквенирование 1-го участка гена)
Х-сцепленный синдром иммунодисрегуляции, полиэндокринопатии и энтеропатии (IPEX-syndrome)
Определение классов и субклассов IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций лимфоцитов, регуляторных T-лимфоцитов CD 4+CD127-CD25+, определение внутриядерной экспрессии транскрипционного фактора FOXP3 методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Молекулярно-генетическое исследование гена FOXP3 (амплификация 12 экзонов гена, SSCP- анализ 12 экзонов, ресеквенирование 3-х участков гена)
Аутоиммунный лимфопролиферативный синдром
Определение уровня IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций Т и В лимфоцитов, СD3+DR, СD4+25+, TCRγδ Т лимфоцитов, СD27+ В лимфоцитов, дополнительно TCRαβ СD3+CD4-CD8- двойных негативных Т клеток, методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Исследование Fas-индуцированного апоптоза методом проточной цитофлуориметрии
Молекулярно-генетическое исследование гена Fаs (амплификация 9 экзонов гена, SSCP- анализ 8 экзонов, ресеквенирование 2-х участков гена)
Хроническая гранулематозная болезнь
Определение уровня IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций Т и В лимфоцитов
Анализ кислородного «взрыва» нейтрофилов Burst-test (respiratory burst in activated neutrophils) методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Дефицит миелопероксидазы
Цитохимическое исследование активности MPO в нейтрофилах, внутриклеточное определение экспрессии MPO в нейтрофилах периферической крови методом проточной цитофлуориметрии
Дефицит адгезии лейкоцитов
Определение уровня IgG, IgM, IgA
Определение субпопуляций Т и В лимфоцитов
Определение экспрессии CD 18, CD11a,b,c на нейтрофилах, исследование миграционной способности лейкоцитов методом проточной цитофлуориметрии (Cytomics FC 500, Beckman Coulter)
Ангионевротический отек
Стандартное иммунологическое исследование
Биохимическое определение С1 ингибитора системы комплемента
Гемофагоцитарный лимфогистиоцитоз
Стандартное иммунологическое исследование
Биохимический анализ крови (определение уровня ферритина, триглециридов, фибриногена)
Тест на цитотоксическую активность натуральных киллеров
Определение sCD25 в сыворотке крови
Врожденная нейтропения
Стандартное иммунологическое исследование
Определение антинейтрофильных антител
Молекулярно-генетическое исследование гена ELANE (амплификация 5 экзонов гена, SSCP- анализ 5 экзонов, ресеквенирование 1го участка гена)